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土壤淀粉酶(Soil Amylase,S-AL)试剂盒说明书微量法

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                                      规格:100管/48样

土壤淀粉酶(Soil Amylase,S-AL)试剂盒说明书

微量法

注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。

产品内容

试剂一:液体8mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体3mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:液体10mL×1瓶,4℃保存。

产品说明

淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物,是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。

淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在508nm处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。

需自备的仪器和用品:

天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、甲苯。

测定操作表:


对照管

测定管

土样(g)

0.02

0.02

甲苯μL

10

10

25℃静置15min

试剂μL

110

50

试剂μL


60

充分混匀,37℃震荡培养1h8000rpm25℃,离心10min

上清液μL

100

100

试剂三(μL

100

100

充分混匀,90℃水浴5min,待冷却后,于微量石英比色皿/96孔板中测定508nm吸光值,分别记为A对照管和A测定管,△A=A测定管-A对照管。

计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

   标准曲线:y = 0.2525x - 0.034R= 0.9917

酶活单位定义:每g土样每天催化生成1mg还原糖为一个酶活力单位。

S-ALmg/d /g=(△A +0.034)÷ 0.2525×V反总÷W÷T

= 10.464×(△A +0.034)÷W

V反总:反应体系总体积,0.11mLT:反应时间,1/24dW:样本质量,g

b. 96 孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.1263x - 0.034R= 0.9917

酶活单位定义:每g土样每天催化生成1mg还原糖为一个酶活力单位。

S-ALmg/d/g=(△A +0.034)÷ 0.1263×V反总÷W÷T

=20.928×(△A +0.034)÷W

V反总:反应体系总体积,0.11mLT:反应时间,1/24d; W:样本质量,g

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