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RNA Pulldown、DNA Pull-down原理及步骤

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更新时间:2025-02-06 09:28:31浏览次数:3762次

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产地类别 国产 应用领域 医疗卫生,生物产业
提供商:上海研谨生物
服务项目:RNA Pulldown、DNA Pull-down实验原理及步骤
实验周期: 1-2个月
价格:2000元
收费标准/服务周期/提供结果:
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更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询!

RNA Pulldown、DNA Pull-down实验代做

 

 

实验意义

 

核酸与蛋白质的互作是细胞功能的核心,包括蛋白质合成、mRNA组装等生命活动中重要的代谢过程,研究核酸与蛋白质的互作是研究生命科学的基本工具。

 

实验原理及步骤

RNA Pull-down:通过体外转录RNA并用生物素进行标记,然后与胞浆蛋白混合物共同孵育形成RNA蛋白质复合物,然后用链霉亲和素标记的磁珠分离纯化该复合物(利用生物素与链霉亲和素的非共价亲和作用)。洗脱后进行检测,如果检测蛋白为已知蛋白可通过WB进行鉴定,如果检测未知蛋白则可以结合质谱进行鉴定。流程为提取细胞胞浆蛋白样品液- -体外转录合成生物素标记RNA-共孵育_ -磁珠纯化- -洗脱得到互作蛋白. -WB或质谱鉴定。

DNA Pull-down:通过合成标记有生物素的DNA----片段,与细胞核蛋白混合物共同孵育形成DNA-蛋白质复合物,然后用链霉亲和素磁珠纯化,WB或者质谱进行检测鉴定。流程为提取核蛋白样品液- -合成生物素标记DNA-共孵育- -磁珠纯化- ~洗脱

得到互作蛋白- -WB或质谱鉴定。

 

结果展示

RNA Pull-down

 

 

 

 

DNA Pull-down .

 

 

 

实验周期及交付标准

1.实验周期: 1-2个月

2.交付标准:

RNA Pull-down:探针序列、X光片.实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)

DNA Pull-down:探针序列、X光片.实验报告(实验步骤.试剂、仪器等)

 

需确认信息

1.目的基因种属及ID号

2.基因序列信息

3.样本种属及类型

4.样本数量.

5.分析要求

参考文献

[1]Chen R,Liu Y,Zhuang H,et al. Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MAL AT1 interacts with

DBC1 to regulate p53 acetylation[J]. Nucleic Acids Research, 2017, 45(17):9947-9959.

[2]Tran D H , Shishido Y,Chung S P , et al. lnentication of DNA-binding proteins that interact with the 5-f1anking region

of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and

mass spectrometry[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2015, 116:94-100.

 

 

实验代做服务:

 

免疫组化IHC染色实验服务

细胞、组织TUNEL凋亡染色实验服务

试剂盒免费代检测

实验室代做实验项目

 

透射电镜服务实验服务

石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡

核仁组成区嗜银-AGNOR染色实验服务

免疫共沉淀(CHIRP)实验

RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验代做

酶联免疫(ELISA)技术服务

鸡传染性法氏囊病病毒VP2抗体诊断试剂盒

喹诺酮类快速检测试剂盒

组织芯片/微阵列定制技术服务

 

染色质免疫沉淀分析(CLIP)实验服务

 

多因子液相芯片技术(Luminex)实验

免疫细胞化学ICC实验服务

ATP/ADP检测实验服务

蛋白双向(2-D)电泳实验服务

蛋白相互作用分析

碱性磷酸酶染色实验服务

PKC活性检测实验

非标定量实验

(Label-free)

 

DIGE技术实验服务

端粒酶活性检测实验

细胞生长曲线的测定

扫描电镜服务

NF-KB p65活性检测实验

 

慢病毒包装实验服务

实验室代做实验项目

主营:实验室代做实验项目$r$n1.实验代做$r$n2.生化试剂、标准

免疫组化技术服务

公司主营:免疫组化技术服务$r$n1实验代做$r$n2生化试剂、标准品

实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务

主营:实时荧光定量PCR(RealTime PCR)技术服务$r$n1

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