猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒说明书
【产品名称】
通用名称:猪弓形虫抗体ELISA检测试剂盒
英文名称:ELISA Kit For Swine Toxoplasma gondii Antibodies
【规格】
96T×2/盒
【用途】
用于检测猪血清样本中猪弓形虫抗体。
【注意事项】
- 所有试剂用前应恢复至室温18 ~26℃ ,用完后返回到2-8℃以便下次使用。
- 请在试剂盒规定的有效期内使用;禁止非同批试剂盒混用。
- 没用完的微孔板应贮存在密封铝箔袋内,于2℃-8℃存放。
- 用过的材料要无害化处理,处理时遵照当地、区域以及国家法规。
- 避免单底物液暴露于强光,避免 接触氧化剂。
- 待检血清样品数量较多时,应先使用血清稀释板稀释完所有待检血清,再将稀释好的血清转移到检测板,使反应时间一致。
- 浓缩洗涤液用去离子水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
- 严格按照操作程序,仔细地吸液、计时、充分洗涤,对于获得精q的结果是非常必要的。
【主要组成成份】
1 | 弓形虫抗原包被板 | 96T×2 | |
2 | 酶标记物 | 22ml | 黄色帽 |
3 | 样本稀释液 | 50ml | 透明帽 |
4 | 猪弓形体阴性对照血清 | 1.5ml | 绿色帽 |
5 | 猪弓形体阳性对照血清 | 1.5ml | 红色帽 |
6 | 显色剂 | 12ml×2 | 橙色帽 |
7 | 终止液 | 12ml | 蓝色帽 |
8 | 20X浓缩洗涤液 | 50ml | 白色帽 |
9 | 盖板膜 | 2张 |
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10 | 说明书 | 1份 |
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【样品准备】
用样本稀释液40倍稀释待检血清,(例如:117μl血清稀释液中加3μl待检血清)。阴阳对照血清不用稀释,直接加样。
【洗涤液准备】
20倍浓缩的洗涤液使用前恢复至室温并摇匀,待结晶*溶解后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释(例如:10ml的浓缩洗涤液加上190ml蒸馏水)。
【操作步骤】
- 取抗原包被板(根据样品多少,可拆开分次使用),将稀释好的待检血清、阳性对照血清和阴性对照血清,各取100μl加入到抗原包被板孔中,阳性对照和阴性对照,各设2孔。轻轻振匀孔中样品(勿溢出),用盖板膜覆盖包被板,置37℃温育30分钟。
- 打开盖板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗涤液注满反应板孔,静置10秒,直接甩出,洗涤3次,后一次洗涤后在吸水材料上拍干。
- 每孔加酶标记物100μl,盖好盖板膜,置37℃温育30分钟。
- 打开盖板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗涤液注满反应板孔,静置10秒,重复洗涤3次,后一次在吸水材料上拍干。
- 每孔加入单底物液100μl,混匀,盖好盖板膜,37℃避光显色10分钟。
- 打开盖板膜,每孔加终止液50μl,10分钟内测定结果(测定前轻轻振匀,勿溢出)。
【结果判定】
在酶标仪上测各孔的OD值。检测结果有效的条件是阳性对照孔的OD450/630值必须≥0.6,阴性对照孔的OD450/630值必须<0.15;
Cutoff值(COV)=阴性对照平均OD值×2.1(阴性对照孔OD值小于0.08时,按0.08计算)
样品OD值≥2COV判为弓形体抗体阳性;样品OD值<COV判为弓形体抗体阴性,介于阳性和阴性OD值之间的数值判为可疑。
【储存条件及有效期】
2℃~8℃保存,有效期12个月。
【生产日期及批号】
详见包装袋和外包装盒。