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亚铁- 检测试剂盒(TPTZ微板法)是一种用于检测亚铁离子(Fe??)含量的试剂盒。以下是对该试剂盒的详细介绍:
一、基本原理
TPTZ(2,4,6-三吡啶基三嗪)在酸性条件下与亚铁离子反应,形成一种蓝色的络合物,该络合物在特定的波长(如593nm)下具有最大吸收峰。通过测定该波长下的吸光度,可以计算出样品中亚铁离子的含量。
二、试剂盒组成
亚铁- 检测试剂盒(TPTZ微板法)通常包含以下组分:
试剂R1:甘-氨酸缓冲液(pH值特定,如pH 1.7),含有一定量的L-抗坏血酸或其他还原剂,用于提供反应所需的酸性环境和还原条件。
试剂R2:甘-氨酸缓冲液(pH值与试剂R1相同),含有TPTZ,用于与亚铁离子反应形成蓝色络合物。
标准品:已知浓度的亚铁离子溶液,用于建立标准曲线和校准仪器。
其他材料:可能包括96孔板、封板膜、移液器等用于实验操作的辅助材料。
三、操作步骤
样品准备:根据实验需求,准备待测的样品溶液。样品可以是血清、血浆、组织匀浆等。
标准曲线制备:将标准品稀释成不同浓度的溶液,与试剂R1和R2反应后,在特定波长下测定吸光度,建立标准曲线。
样品测定:将待测样品与试剂R1和R2反应,同样在特定波长下测定吸光度。
结果计算:根据标准曲线和样品吸光度,计算出样品中亚铁离子的含量。
四、注意事项
操作环境:实验过程中应避免光照和高温,以免影响实验结果。
样品处理:样品应充分混匀,并避免使用含铁的器皿和试剂,以减少铁污染。
反应时间:反应时间应严格控制,以保证结果的准确性。
仪器校准:使用前应对分光光度计或酶标仪进行校准,确保测定结果的准确性。
仅供科研实验用,不做其他用途!
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