当细胞培养中出现微生物污染时，挽救措施需要根据污染的类型和程度进行有针对性的处理。以下是一些常见的微生物污染及其挽救措施，参考了多篇专业文章的内容：

1.细菌污染

特点：

培养液通常会出现浑浊、pH下降。

显微镜下可见细胞胞浆出现大量颗粒，细胞变圆或崩溃。

挽救措施：

丢弃污染细胞：如果污染细胞价值不大，建议直接丢弃。

消毒：寻找污染原因后，对操作室进行消毒。

使用抗生素：若污染细胞价值较大，可尝试使用抗生素清除细菌。联合用药比单独用药效果好，预防用药比污染后再用药效果好。

预防用药一般用双抗生素，污染后清除用药需采用大于常用量5～10倍的冲洗法，于加药后作用24～48小时，再换常规培养液。

2.真菌污染

特点：

短期内培养液不浑浊，但在表面形成白色或黄色漂浮物。

高倍镜下可见明显的丝状、管状或树枝状菌丝。

挽救措施：

建议丢弃：真菌污染较难处理，通常建议消杀后丢弃污染的细胞和培养基。

3.支原体污染

特点：

支原体大小为0.1-0.3µm，可通过0.22µm和0.45µm孔径滤膜。

常规光学显微镜下无法观察到，但荧光显微镜下可用DAPI染色观察到。

挽救措施：

丢弃污染细胞：同样，如果污染细胞价值不大，建议直接丢弃。

使用支原体清除试剂：如zellshield细胞支原体去除剂（四代培养）处理，祛除支原体效果明显，同时对细胞内和细胞外的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、病原虫、真菌等污染亦可有效预防。

4.黑胶虫污染

特点：

关于黑胶虫是否是一种生物还有争议。

挽救措施：

根据细胞状态判断：若细胞状态尚可，可尝试添加黑胶虫/支原体抑制剂培养2-3代看是否能转阴；若细胞状态很差，建议消杀后丢弃。

5.预防措施

无论哪种污染，预防都是关键：

严格执行无菌操作：经常更换手套、使用经过有效消毒的培养器具和培养基等。

清洁和消毒实验环境：定期清洁和消毒实验室环境及设备，可用支原体祛除喷雾剂Mycoplasma Off™定期清洁实验室仪器、工作台表面。

控制空气中的微生物：使用高效过滤器的实验室通风设备，定期更换过滤器。

识别和处理污染源：经常检查培养器具、培养基和试剂等是否存在污染，一旦发现污染，应及时处理。

通过综合以上挽救措施和预防措施，可以一定程度地减少细胞培养中的微生物污染，保证实验的顺利进行。