FBS胎牛血清解冻方法可使用国际上推荐的三步法融化解冻,可尽可能减少沉淀出现,保留血清中因子的活性。
要点一:此三步融化法,适用于所有血清,在水浴过程中,血清的平面要尽量浸在水中,但瓶口不要没入水中,防治瓶口污染。在融化过程中要经常慢慢摇动瓶身,使血清混匀,但摇动不要剧烈,尽量不要产生泡沫!
要点二:如果你的血清平时是储存在-80℃的血清,融化前则需提前几天先转移至-20℃冰箱中复温(至少24小时),再使用三步法溶解,避免温差过大,更易导致血清中蛋白凝集。
要点三:为**限度保留血清中因子的活性,减少冻融次数,血清应遵循现用现配,现配现解冻的原则。解冻的血清,应根据实验需求,将其分装,保证每一份够一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。分装好的血清,密封好后,立即放回-20℃冰箱继续冷冻储存。需要配制培养基的时候,再从-20℃冰箱中取出一管来尽快解冻使用(能全部配成培养基,不要有剩余),配好的培养基在4℃冰箱储存不超过一周。