NOVOCIB的细菌荧光素酶是从我们团队从鱿鱼中分离的磷光杆菌菌株中纯化出来的，并因其最亮的发光而被选择。通过PCR扩增luxab基因并进行克隆。克隆的α和β亚基序列与发光杆菌的P24113和P12744蛋白（SwissProt Entry） 具有94%和92%的同一性。

应用：在发光海洋光细菌中，光的产生是由两个连续反应产生的。第一个由 NAD(P)H-FMN 氧化还原酶 (EC 1.6.8.1) 催化，产生 FMNH ₂作为第二个反应的底物，该反应由荧光素酶 (EC 1.14.14.3) 催化，在脂肪醛和分子氧存在的情况下产生光。在 NADH 底物浓度有限的情况下，光强度与 NAD(P)H 浓度成正比。细菌荧光素酶与 FMN-NAD(P)H 氧化还原酶的偶联已用于提供超灵敏的分析工具，用于定量 NAD(P)H 以及 NADH、NADPH 依赖性酶的底物（例如葡萄糖、乳酸、苹果酸、乙醇、山梨醇、草酰乙酸）⁽¹⁾。

NOVOCIB的高纯细菌荧光素酶可用于 NAD(P)H 定量或脱氢酶偶联测定。

活性：在 10M NADH 和3.5mU /ml FMN 还原酶（参考 E-Nov-8）存在的情况下，使用 Optocomp 1 (Celsis) 测量，每秒每克蛋白质 > 500,000 (5.10 5 ) RLU ) 光度计。 纯度：通过10% AA SDS-PAGE控制。

图 1：使用高纯细菌荧光素酶（50μg/ml，NovoCIB，E-Nov 10）获得的 NADH 校准曲线（双对数图） 。 测定条件：向含有0.1M KH 2 PO 4 pH=6.9、0.02%十二醛、50μM FMN、2mg/ml BSA的200μL孔中添加NADH（5μL）后测量发光信号（15秒） 。在 Optocomp 1 (Celsis) 光度计中跟踪反应。

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