jembio：DNA 连接酶（大肠杆菌）

DNA 连接酶（大肠杆菌）   DNA 连接酶（大肠杆菌）催化双链 DNA 中并置的 5' 磷酸盐和 3' 羟基粘性末端之间磷酸二酯键的形成。  

 描述：

 • 催化具有粘性末端的双链DNA 片段之间磷酸二酯键的形成。 

• 5'-磷酰基与相邻的3'-羟基的缩合与NAD+的水解相结合。

 • 适用于全长cDNA 的高效克隆(1, 2)。 

单位定义：1 个单位定义为 lambda DNA 的 Hind III 片段产生 50% 连接所需的酶量。在 20 µl 检测混合物中于 16°C 下孵育，DNA 末端浓度为 0.02 µM (50 µg/ml)。  储存条件：储存于-20oC。   反应缓冲液：30 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 8.0）、1 mM 二硫苏糖醇、4 mM MgCl2、26 µM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白。 最佳连接温度为 16°C。   

储存缓冲液：10 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 7.4）、50 mM KCl、0.1 mM EDTA、10 mM 硫酸铵、1 mM 二硫苏糖醇和 50% (v/v) 甘油。   

质量控制：所有制剂均经过核酸内切酶和核酸外切酶污染活性测试，以及连接反应中的功能测试。 连接测定条件：30 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 8.0）、4 mM MgCl2、1.2 mM EDTA、1 mM 二硫苏糖醇、0.026 mM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白和 lambda DNA 的 Hind III 片段。 16°C 孵育 30 分钟。  

jembio：DNA 连接酶（大肠杆菌）