MagVigen™ – Poly T mRNA Select
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mag vigen mRNA选择纳米颗粒是信使RNA纯化的理想选择。mag vigen mRNA选择纳米颗粒可从总RNA中高效回收聚腺苷酸尾信使RNA。短时间孵育后，mRNA被MagVigen mRNA选择纳米颗粒捕获。产生的纳米颗粒-聚(A) mRNA复合物可以用磁铁从样品的其余部分中分离出来。保留的mRNA材料可以从纳米颗粒上切割下来，用于产生测序文库。
mag vigen mRNA选择纳米颗粒能够从总RNA中纯化poly(A) mRNA。它们可用于逆转录、RNA探针和RNA文库构建。纯化的mRNA产物可以通过凝胶电泳、PCR定量和测序进一步分析。
产品内容
:
Cat# K61004还包括:
所有材料应储存在4°c下。
保质期:6个月
所需材料
- 去离子水。
注意:
有效捕获mRNA所需的纳米颗粒的量取决于起始材料中多聚(A)尾mRNA的浓度。
通常，每100μg总RNA使用100μl MagVigen mRNA选择纳米颗粒。
重要提示:使用前一定要重新悬浮纳米颗粒。
mRNA捕获协议
结合mRNA
- 从储存中取出MagVigen mRNA选择纳米颗粒，并将其置于室温。
- 使用前，涡旋MagVigen DNA Select纳米颗粒10秒钟。
注意: 确保珠子全重新悬浮并充分分散。
- 取出100μl MagVigen mRNA选择纳米颗粒，放入干净的1.5ml微量离心管中。
- 使用磁性架收集mag vigen mRNA选择纳米颗粒，弃去上清液。
注意: 在微量离心管的侧面应该可以看到含有深棕色纳米颗粒的透明沉淀物。
- 将纳米颗粒重新悬浮在200μl封闭缓冲液中，并在室温下孵育10分钟。
- 使用磁性架收集mag vigen mRNA选择纳米颗粒，弃去上清液。
- 将纳米颗粒重新悬浮在200μl结合缓冲液中。
- 向mag vigen mRNA选择纳米颗粒中添加RNA样品。
- 涡旋或吸取反应溶液，以充分混合。
注意: 在捕获反应期间不引入气泡是理想的。
- 在室温下孵育MagVigen mRNA选择纳米颗粒-RNA反应30分钟。
- 孵育后，使用磁铁架从溶液中分离捕获mRNA的纳米颗粒。
- 用移液管小心移去上清液，确保不要干扰捕获mRNA的纳米颗粒沉淀。
洗涤mRNA
- 将纳米颗粒重新悬浮在200μl洗涤缓冲液中，并在室温下放置2分钟。
- 使用磁铁架将捕获mRNA的纳米颗粒从洗涤液中分离出来。小心取出并丢弃上清液。。
- 重复步骤13-14，总共进行两次清洗。
洗脱mRNA
- 通过添加20μl洗脱缓冲液，从纳米颗粒中洗脱捕获的mRNA。
注意: 可以根据需要调节洗脱缓冲液的体积。
- 轻轻吸移至混合均匀，并在室温下孵育5分钟。
注意: 理想的是在洗脱反应过程中不引入气泡。
- 旋转几秒钟以收集溶液。
- 将试管放在磁性架上1分钟，以将纳米颗粒与洗脱的mRNA分离。
- 将含有mRNA产物的上清液转移到干净的试管中。确保不要弄乱颗粒。纯化的mRNA现在准备用于随后的评估。
MagVigen™ – Poly T mRNA Select
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