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诺博莱德 普通RIPA裂解液(组织/细胞)

普通RIPA裂解液(组织/细胞) 样本裂解

产品货号：R8808

产品名称：普通RIPA裂解液(组织/细胞),蛋白提取试剂盒,RIPA buffer

产品规格：100ml /500ml

产品简介：

别名：蛋白提取试剂盒

英文名称：RIPA buffer

中文名称：普通RIPA裂解液(组织/细胞)

规格：100ml ; 500ml

储存条件：附件PMSF-20℃，裂解液4℃。有效期1年

     NobleRyder R8808普通RIPA裂解液(组织/细胞),蛋白提取试剂盒,RIPA buffer产品介绍

运输温度：常温运输

普通RIPA裂解液(组织/细胞)产品配有一支PMSF（100mM，1.5ml）

产品简介：RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜（包括核膜）。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

使用说明 ：

如发现RIPA有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。

根据使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM，混匀备用 （PMSF现用现加）。

1、样品前处理：

a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 5-10×105细胞/管，然后再裂解。

c)对于组织样品：把组zhi剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液

(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量) 。

用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。

2、后处理：

将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

注意事项：

1、使用本裂解液可以裂解细胞核，释放出核蛋白的同时，也会将基因组一并释放出来， 造成细胞裂解液粘稠，此时可以直接加入蛋白上样缓冲液煮沸再离心，离心后直接上样电泳； 若想测定浓度，可入加少量 SDS（1%），煮沸后离心测浓度。

2、本系列蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒，请选择 BCA 法或者 Lowry 法检测蛋白浓度。

3、如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物， 随后离心取上清用于后续实验。

普通RIPA裂解液(组织/细胞) 样本裂解

产品订购信息：

R8808普通RIPA裂解液(组织/细胞),蛋白提取试剂盒,RIPA buffer 100ml /500ml