酵母总蛋白提取试剂盒 常备现货 返回列表页

酵母总蛋白提取试剂盒 常备现货

NobleRyder  BC1568 酵母总蛋白提取试剂盒

产品货号：BC1568

产品名称：酵母总蛋白提取试剂盒

产品规格：50T/100T

产品简介：

中文名称：酵母总蛋白提取试剂盒

规格：50T ; 100T

储存条件：-20℃，avoid light，1 year

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

产品介绍

酵母蛋白提取试剂盒含有EDTA，山梨chun和蜗牛酶，蛋白酶抑制剂。蜗牛酶在合适的等渗体系中消化酵母的细胞壁，再用等渗液冲洗后，用含有蛋白酶抑制剂和温和去污剂的低渗缓冲液进行反复冻溶，促进细胞破裂，从而释放蛋白质。本产品是含Tris、EDTA、NaCl、DTT和蛋白酶抑制剂等成分的缓冲液体系，保留了蛋白的生物学特性和功能。

应用

适用于重组蛋白或酵母蛋白的活性提取，可用于Western Blot、免疫沉淀、蛋白活性检测等。为1倍的缓冲液，可以处理1,000 mg湿重酵母。

操作步骤（仅供参考）：

注：β-巯基还原剂，蛋白酶抑制剂（100×），PMSF（100X）这几个试剂使用前先用掌上离心机进行离心。

1、收集 OD600 = 1.0 酵母菌体，4℃，12000rpm 离心 5min ,弃去上清液。

2、将菌体称重，按照比例（50mg：500 µL）向沉淀中加入 500 µL 破壁溶液Ⅰ，重悬菌体，冰上孵 育 5min。

3、4℃，12000rpm 离心 2min，弃去上清，向沉淀中加入 500 µL 破壁溶液Ⅱ，重悬菌体，冰上孵育 5min。

4、在 500 µL 的裂解液中加入 5 µLPMSF，5 µL 蛋白酶抑制剂和 12.5 µL β-巯基还原剂；混匀，放置在冰上备用(根据实际用量准备适量裂解液），现用现配。

5、4℃，12000rpm 离心 2min,弃去上清，向沉淀中加入 500 µL 上述提前备好的裂解液重悬菌液。室 温震荡 40min~60min，或者煮沸 5min。

6、裂解结束后，4 ℃ ，12000rpm 离心 10min。收集上清用于后续实验。

注意事项:

1、裂解液在低温条件下可能会出现沉淀析出现象，37 度水浴加热至沉淀wan全溶解再使用。

2、β-巯基还原剂低温状态下可能比较粘稠，可恢复室温后使用。

3、提取后的蛋白溶液中含有还原剂，如果要测浓度，请先沉淀蛋白，然后用 PBS 重新溶解蛋白后 再进行测定，否则会影响结果。

4、按照每 50 mg 湿重加 500 µL 的破壁溶液和裂解液，菌体的量不能够过多,否则会使的菌体裂解不 充分。

5、裂解后的酵母菌蛋白液,应在-80℃的冰箱中保存。

6、裂解液中盐离子浓度较高，必要时可除盐后使用。

7、如果提取磷酸化蛋白，需要加入磷酸酶抑制剂。

8、本试剂只能够用于体外实验科研实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等，由此产生的后果，概不承担责任。

酵母总蛋白提取试剂盒 常备现货

产品订购信息：

NobleRyder  BC1568 酵母总蛋白提取试剂盒 50T/100T