动物肿瘤组织病理切片 返回列表页

1取材和固定

切取组织时应使用锋利的刀、剪，切取组织块时，从刀的根部开始向后拉动切开组织。组织块的厚度约为0.2~0.3cm，大小为1.5cm×1.5cm x 0.3cm为宜。取好的组织块置于10%福尔马林中固定48小时；

2洗涤与脱水

将固定后的组织用流水冲洗，去除残留的固定液和杂质。不同浓度的乙醇逐级脱水，50%、70%、85%、95%直至纯酒精（无水乙醇），每级2小时。脱水必须在有盖的瓶中进行，以防止高浓度乙醇吸收空气中水分导致浓度降低而使脱水不*。需要保存的材料可脱水至70%乙醇时停留其中，如需长期保存，可加入等量的甘油。

3透明

将组织块置入纯乙醇和二甲苯的等体积混合液中2小时，再进入纯二甲苯两小时，再一次纯二甲苯两小时；材料经过透明，会显示出前一步脱水的效果如何，若脱水*，组织则显现透明状态，如组织中有白色云雾状，说明脱水不净，须返工处理，但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明时，应避免其挥发和吸收空气中的水分，并保持其无水状态。

4浸蜡

浸蜡须在恒温箱中进行。先把组织材料块放在熔化的石蜡和二甲苯的等量混合液浸渍1～2小时，再先后移入2个熔化的石蜡液中浸渍各3小时左右；

5包埋

包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。具体做法是；先准备好纸盒，将熔蜡倒入盒内，迅速用预温的镊子夹取组织块平放在纸盒底部，切面朝下，再轻轻提起纸盒，平放在冷水中，待表面石蜡凝固后立即将纸盒按入水中，使其迅速冷却凝固，30min后取出。

6切片

切片前将蜡块在-20度冰箱中至少放置30min，以增加硬度。将切片刀装在刀片机的刀架上并固定紧，固定蜡块底座或蜡块，调整蜡块与刀至合适位置，刀刃与蜡块表面呈5度角。调整切片机上的切片厚度为4-7μm，然后切片。