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CoC1/DDP人结肠癌顺铂耐药细胞 含STR鉴定

来源:上海琛艺实业有限公司   2019年06月27日 16:20  

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

CoC1/DDP人结肠癌顺铂耐药细胞 含STR鉴定

 

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

 

 

 

产品信息

名称CoC1/DDP人结肠癌顺铂耐药细胞 含STR鉴定
别称COC1/DDP
种属
组织来源卵巢
生长特性悬浮细胞
细胞形态淋巴母细胞样
背景描述COC1/DDP细胞是由陈惠桢教授等用药物剂量增选法筛选获得的COC1细胞耐药亚株。COC1/DDP细胞对顺铂(DDP 1μg/ml)的耐受性是亲本株(COC1细胞)的6.5倍;同时,对卡铂(CBD-CA)、C(MMC)也具有不同程度的交叉耐受性。COC1/DDP细胞可用于卵巢肿瘤治疗的体外试验研究。
生长培养基RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-500)+0.5-2μg/ml DDP+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例1:2-1:4
推荐换液频率2-3次/周
冻存条件冻存液:50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO温度:液氮
培养条件气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃
致瘤性Yes, forms tumors in nude mice.

组成:

组份

数目

细胞

 1 T-25

细胞说明书

一份

  • CCRF-CEM人急性T淋巴细胞白血病 含STR鉴定简介:

生长特性:

贴壁生长

 

细胞来源:

ATCC/中科院/协和医院等地引进

培养条件:

培养基:F12K+0.1mg/ml肝素+1%ECGS +10%FBS(推荐德国SERANA S-FBS-SA-015优等胎牛血清)

气相:空气95%,二氧化碳5%

温度:37

培养:

  • 贴壁细胞

1.75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,次传代比例为1:2

3传代步骤:将0.25%EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入*培养基重悬细胞,进行传代。

 

二、悬浮细胞

1.75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清;

2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基);

3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。

 

细胞总数:

1~3*106

传代周期:

2-3

传代比例:

1:2~1:4

换液频率:

2-3

冻存液:

90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事项:

收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养

对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。

建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于72h与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。

 

做细胞实验的同学看过来。

选择上海琛艺生物细胞有3个理由:

1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;

2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;

3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验,效果更佳。

 

 

专业技术人员万工收藏的细胞培养小技巧:

1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。

2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。

3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。

4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。

5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。

 

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