SGC7902/DDP-GFP人胃癌顺铂绿色标记耐药株 培养步骤

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上海琛艺实业有限公司提供ATCC原代细胞，ATCC菌株代购，同时上海琛艺新增细胞库，具有自己的研发细胞培养库，上千株细胞具有STR鉴定，开春大放送，*，同时还有好礼相送，具体欢迎咨询我们销售人员。。。。

SGC7902/DDP-GFP人胃癌顺铂绿色标记耐药株 培养步骤 含STR鉴定

【细胞传代】：1:3 传代

【细胞活力】：90％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

【细胞检测】：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

【细胞冻存】：液氮冻存（基础培养基+10%DMSO+20%FBS）

【细胞运输】：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）

详细背景： 这株细胞的细胞骨架染色突出呈现肌动蛋白，在细胞质中有丰富的平行微丝。有报道称在1uM血管紧张素II存在下，它们会收缩。细胞在软琼脂中形成克隆，SV40大T抗原阳性。

细胞来源： 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

SGC7902/DDP-GFP人胃癌顺铂绿色标记耐药株 培养步骤 含STR鉴定

"购买细胞注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，OSKMZ-1小鼠诱导型多能干细胞| OSKMZ-1动物

显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。

规格： 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）

细胞规格： 1*10(5)/ml——1*10（6）/ml

(二)     慢病毒包装部分

1. 质粒共转染细胞：转染前一天， 293T在10cm培养盘中的细胞达到90％，胰酶消化后，1：3传入新10cm培养盘中。转染时，细胞在培养盘中密度达到80％。采用脂质体PEI转染法使编码慢病毒包膜蛋白的质粒VSV G, Packaging Mix以及构建的Gluc质粒15μg共转染。6h后换新鲜DMEM培养基。

2．提取病毒上清：转染48-72hours后，将含有病毒液的培养基转移到15ml离心管中,在低温4摄氏度条件下，3000rpm，离心10min去除片状沉淀的细胞碎片。

3．浓缩病毒：将病毒上清用0.45um滤器过滤至浓缩离心管中，2000rpm，4℃，15min离心。浓缩液收集于500μl离心管中，-80℃保存。