上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。
产品名称:SNU-5-LUC人胃癌荧光素酶标记细胞 处理方法 含STR鉴定
特点:细胞代数为4代以内,细胞耐药倍数8倍以上;
包装:内层无菌自封袋;防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!
注:耐药细胞培养操作流程和普通细胞培养方法基本一致,只是在培养中会加药维持筛选压力
- SNU-5-LUC人胃癌荧光素酶标记细胞 处理方法 含STR鉴定
- 三、细胞生长条件:
- 组成:
组份 | 数目 |
细胞 | 1 T-25瓶 |
细胞说明书 | 一份 |
- 细胞简介:
生长特性: | 贴壁生长
|
细胞来源: | 从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
培养条件: | 培养基:90%1640培养基 +10%FBS(推荐BI -04-001-1ACS*胎牛血清) 气相:空气95%,二氧化碳5% 温度:37℃ |
培养: |
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代; 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,第yi次传代比例为1:2。 3传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第yi次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为消化时间,记录消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入*培养基重悬细胞,进行传代。
二、悬浮细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清; 2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基); 3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,第yi次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。
|
细胞总数: | 1~3*106 |
传代周期: | 2-3天 |
传代比例: | 1:2~1:4 |
换液频率: | 2-3天 |
冻存液: | 90%FBS+10%DMSO |
@geraldor:你好,你的意思是紫外线照过之后,实验操作开始了,如果万一发现少拿了什么,就直接酒精喷一下再放进去是吗
@llh12:有时确实是忘记,*怕的就是那种实验已经做到一半忘记了的,或者发现东西不够用的。我们一般是这样处理:耗材、移液枪还有金属器皿之类的,可以喷一下酒精放进来,等酒精风干一下,注意不要和其它东西混杂。反正一般细胞的也有外包装,里面已经是无菌无内毒素。如果是试剂,那就是直接从冰箱拿出来放进来就是。(如果只是实验还没有真的开始,把漏掉的东西加上,再照30分钟就是。)
@姚丽佳:请问MHCC97H-GFP-LC3细胞传代前,经过胰酶处理后,加了培养基后不用离心直接分瓶吗?那后面培养的时候不就含有胰蛋白酶了吗?不会产生影响吗?
@llh12:是的,不用离心直接分瓶。之后加入含血清的培养基中止了胰酶作用。如果是贴壁细胞,一般第二天就贴壁了。分瓶后第二天再全部换液。如果是半悬浮细胞,一般都不用胰酶消化,都是直接吹下来。
MHCC97H-GFP细胞
1.【无菌环境】 在MHCC97H-GFP-LC3细胞细胞实验之前要注意无菌环境的建立,紫外杀毒灭菌,酒精消毒都是十分有必要的。
2.【镜下检查】 镜下检查结果非常重要,镜检的结果非常重要,要根据你自己的观察进行细胞密度的识别,从而进行细胞传代比例的确定,进行更好的细胞数量的控制,如果实验要求比较高,需要细胞计数板计数。
3.【过火焰】
记住,所有开瓶的东西都要进行过酒精灯外焰,瞬间高温进行灰尘的固定。这样会大大减少染菌几率。
4.【移液工具】
很多人对于移液工具都有偏好,不好说什么就是正确的。但是从无菌角度。使用移液管比微量移液枪减少污染的几率要高。希望大家能用移液管。
5.【交叉污染】
混匀细胞悬液和移取培养基以及血清的工具要分开;还有就是胰酶和血清也要严格分开,否则容易造成交叉感染,使细胞增加染菌几率。
T47D-LUC | 人乳腺癌细胞-荧光素酶标记 |
T47D-GFP | 人乳腺癌细胞-绿色标记 |
Tca-8113-LUC | 人舌癌细胞-荧光素酶标记 |
Tca-8113-GFP | 人舌癌细胞-绿色标记 |
TE-10-LUC | 人食管癌细胞-荧光素酶标记 |
TE-10-GFP | 人食管癌细胞-绿色标记 |
TE-11-LUC | 人食管癌细胞-荧光素酶标记 |
TE-11-GFP | 人食管癌细胞-绿色标记 |
TE-13-LUC | 人食管癌细胞-荧光素酶标记 |
TE-13-GFP | 人食管癌细胞-绿色标记 |
U-2OS-LUC | 人骨肉瘤细胞-荧光素酶标记 |
U-2OS-GFP | 人骨肉瘤细胞-绿色标记 |
U251-LUC | 人神经胶质瘤细胞-荧光素酶标记 |
U251-GFP | 人神经胶质瘤细胞-绿色标记 |
U87MG-LUC | 人恶性胶质母细胞瘤细胞 |
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