C6-LUC大鼠神经胶质瘤荧光素酶标记细胞 培养步骤

上海琛艺实业有限公司新增细胞库，具有自己的研发细胞培养库，上千株细胞具有STR鉴定，开学大放送，*，同时还有好礼相送，具体欢迎咨询我们销售人员。。。。

产品名称：C6-LUC大鼠神经胶质瘤荧光素酶标记细胞 培养步骤 含STR鉴定
·细胞数量： 1*10^6
·细胞种属： 人源
·生长特性： 贴壁
·培养基： DMEM-H
·形态特征： 成纤维细胞样
·传代方法： 1:3传代,2-3天传一代
·培养条件： 胎牛血清至终浓度为10％。环境：空气，95％;二氧化碳（CO2），5％；温度，37℃
·细胞描述： 亲本L的亚克隆，是早建立的连续传代细胞之一，L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+，HPRT+。
·细胞冻存： 液氮冻存（冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO）
·细胞运输： 干冰运输（2ml冻存管）或活细胞运输（T25瓶）

 
C6-LUC大鼠神经胶质瘤荧光素酶标记细胞 培养步骤 含STR鉴定
形态特性 上皮细胞样　 
生长特性 贴壁生长 

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　 
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期，细胞间期较长，而细胞分裂期较短。
细胞间期是为细胞分裂的准备时期，表现为细胞增大，营养物质增多。细胞分裂期则是一个细胞由两个细胞分解为一个细胞的过程。
细胞是生命的基本单位，细胞的特殊性决定了个体的特殊性，因此，对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、改造生命和征服疾病的关键。细胞生物学已经成为当代生物科学中发展的一门学科，是生物、农学、医学、畜牧、水产和许多生物相关专业的一门必修课程。
依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取 10 ml培养基加至 T25或 T75 flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T25 或T75 flask 内之培养基， 混 合均匀，放入37 °C，5 % CO2 培养箱培养。
 
培养步骤：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，*脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
 
PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。
 
上海琛艺是一家专业从事细胞培养相关产品的公司，拥有独立细胞房（可随时约定参观），供应胎牛血清，STR鉴定细胞，感受态细胞等，专业，专注，性价比高，是您Shou选之家。

原代细胞系构建，耐药株筛选，Cas9基因敲除株，STR检测及动物模型构建，课题设计整体服务！细胞-动物产品研发与服务平台,PDX新一代药筛平台.

技术：凡是从我司购进的细胞可联系工作人员索要相关细胞说明书资料。且提供技术支持服务。

规格：70%密度的T25培养瓶的细胞一瓶/1ml冻存细胞2管，干冰运输
包装：细胞代数为4代以内包装：内层无菌自封袋；防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；或干冰运输

货期：4代复苏细胞，1-2周（不含节假日）/1代冻存细胞，1-2个工作日

售后：收到细胞后7天内，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应及时拍照反馈给销售人员，我们将尽快为您解决！

我们的细胞在发货之前会进行质检，并在发货时附带质检报告。
质检内容:
1、细胞存种的活性和增殖检测
2、发货前的细菌/真菌/霉菌污染物镜检
3、发货前的支原体/衣原体 PCR检测