上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。
产品名称:LLC细胞|LLC-LUC小鼠肺癌荧光素酶标记细胞 处理方法 含STR鉴定
包装:内层无菌自封袋;防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!
- Hepa 1-6细胞 Hepa 1-6小鼠肝癌细胞
- 三、细胞生长条件:
- 组成:
组份 | 数目 |
细胞 | 1 T-25瓶 |
细胞说明书 | 一份 |
- 细胞简介:
生长特性: | 贴壁生长
|
细胞来源: | 从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
培养条件: | 培养基:1640 +10%FBS(推荐德国BI 04-002-1A 优等胎牛血清) 气相:空气95%,二氧化碳5% 温度:37℃ |
培养: |
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代; 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,di一次传代比例为1:2。 3传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为佳消化时间,记录佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入*培养基重悬细胞,进行传代。
二、悬浮细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清; 2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基); 3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,di一次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。
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细胞总数: | 1~3*106 |
传代周期: | 2-3天 |
传代比例: | 1:2~1:4 |
换液频率: | 2-3天 |
冻存液: | 90%FBS+10%DMSO |
四、注意事项:
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。
LLC细胞|LLC-LUC小鼠肺癌荧光素酶标记细胞 处理方法 含STR鉴定
可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:
(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
用途:仅供科研使用。
LLC-luc小鼠肺癌细胞-荧光素| LLC-luc细胞
小鼠胚胎干细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的*培养基。
4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备L-15培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,100%。 温度:37摄氏度。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
A。仅供研究之用。
运输保存:采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
OSKM-1小鼠诱导型多能干细胞一般培养方法:
1、组织块培养法
A)按照前述方法取材,将组织剪成或切成1mm3大小的小块,并加入少许培养基使组织湿润。
B)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块间距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培养瓶(底面积为437.5px2)可接种20~30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。
C)培养2~4小时,待小块贴附后,将培养瓶缓慢翻转平放,静置培养,动作要轻,严禁摇动和来回振荡,以防小鼠诱导型多能干细胞由于冲动而使小块漂起而造成培养失败,若组织块 不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多,以保持组织块湿润即可,培养24小时后再补液,培养初期移动和观察时要轻 拿轻放,开始几天尽量不去搬动,以利贴壁和生长,培养3~5天时可换液,一方面补充营养,一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。
2、消化培养法
该方法是采用前述的消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质(包括基质、纤维等)去除,使细胞分散形成细胞悬液,然后分瓶培养。
3、悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
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