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LLC细胞|LLC-LUC小鼠肺癌荧光素酶标记细胞 处理方法

来源:上海琛艺实业有限公司   2020年07月12日 14:06  

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

 

产品名称:LLC细胞|LLC-LUC小鼠肺癌荧光素酶标记细胞 处理方法  含STR鉴定

包装:内层无菌自封袋;防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!

  • Hepa 1-6细胞 Hepa 1-6小鼠肝癌细胞
  • 三、细胞生长条件:

 

  • 组成:

组份

数目

细胞

 1 T-25瓶

细胞说明书

一份

  • 细胞简介:

生长特性:

贴壁生长

 

细胞来源:

从ATCC/中科院/协和医院等地引进

培养条件

培养基:1640 +10%FBS(推荐德国BI 04-002-1A

优等胎牛血清)

气相:空气95%,二氧化碳5%

温度:37℃

培养:

  • 贴壁细胞

1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,di一次传代比例为1:2。

3传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为佳消化时间,记录佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之*脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入*培养基重悬细胞,进行传代。

 

二、悬浮细胞

1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清;

2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基);

3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,di一次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。

 

细胞总数:

1~3*106

传代周期:

2-3天

传代比例:

1:2~1:4

换液频率:

2-3天

冻存液:

90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事项:

1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养

3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力并与本公司销售人员及时联系

4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后

 LLC细胞|LLC-LUC小鼠肺癌荧光素酶标记细胞 处理方法  含STR鉴定

 

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:

 

 

 

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

 

 

 

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

 

 

 

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

 

 

 

用途:仅供科研使用。

 

LLC-luc小鼠肺癌细胞-荧光素| LLC-luc细胞

 

小鼠胚胎干细胞接收后的处理:

 

 

 

1) 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。

 

 

 

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

 

 

 

3) 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的*培养基。

 

 

 

4) 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。

 

 

 

5) 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

 

 

 

 细胞培养步骤

 

 

 

一.培养基及培养冻存条件准备:

 

 

 

1) 准备L-15培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

 

 

 

2) 培养条件: 气相:空气,100%。 温度:37摄氏度。

 

 

 

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

 

A。仅供研究之用。

 

运输保存:采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

 

OSKM-1小鼠诱导型多能干细胞一般培养方法:

 

1、组织块培养法

 

A)按照前述方法取材,将组织剪成或切成1mm3大小的小块,并加入少许培养基使组织湿润。

 

B)将小块均匀涂布于瓶壁,每小块间距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培养瓶(底面积为437.5px2)可接种20~30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。

 

C)培养2~4小时,待小块贴附后,将培养瓶缓慢翻转平放,静置培养,动作要轻,严禁摇动和来回振荡,以防小鼠诱导型多能干细胞由于冲动而使小块漂起而造成培养失败,若组织块 不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多,以保持组织块湿润即可,培养24小时后再补液,培养初期移动和观察时要轻 拿轻放,开始几天尽量不去搬动,以利贴壁和生长,培养3~5天时可换液,一方面补充营养,一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。

 

2、消化培养法

 

该方法是采用前述的消化分散法,将妨碍细胞生长的细胞间质(包括基质、纤维等)去除,使细胞分散形成细胞悬液,然后分瓶培养。

 

3、悬浮细胞培养法

 

对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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