L1210细胞|L1210/DDP小鼠白血病顺铂耐药株培养步骤

L1210细胞|L1210/DDP小鼠白血病顺铂耐药株培养步骤

【背景资料】 见细胞说明书
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性，一般细胞培养PBS量是10%，如果出现细胞状态不良情况，可以提高PBS量到15%，SHEE人永生化食管上皮细胞待细胞稳定后，调回PBS量10%，对于初次实验者，一般细胞培养，都需要加入双抗防止细胞污染，细胞汇合度达到90%，我们开始寄送，这样可以保持细胞收到时，良好的细胞活力。
一、售前
         上海琛艺实业专业为国内科研提供高品质细胞和优质服务，QC检测合格后发货保证细胞状态良好，发货前保证质量。
 
二、售后
         收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈，会有技术同步指导操作协助解决，如仍未养活免费重发。建议及时保种，有备无患！
 
三、细胞生长条件：
培养条件   
GIBCO(培养基90% +10%FBS)
温度                   
                    37℃
空气条件  
5% CO2，,95% AIR
传代方法
1:2传代，2~3天换液
冻存条件
90%FBS+10%DMSO
 
四、细胞收到后处理
    细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满*培养液并封好瓶口是细胞运输的好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的*培养液移入废液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培养液，悬浮细胞需离心处理，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。

本公司生产的小鼠甲状腺滤泡上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经PCK/TG免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

参数规格

1） 来源：甲状腺

2） 形态：上皮细胞样

3） 含量：>1x106 个/mL

4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

产品相册

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：

（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；

（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

（3）收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

用途：仅供科研使用。

L1210细胞|L1210/DDP小鼠白血病顺铂耐药株培养步骤

小鼠胚胎干细胞接收后的处理：

1） 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2） 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3） 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml新的*培养基。

4） 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。

5） 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

 细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备L-15培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，100%。 温度：37摄氏度。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

A。仅供研究之用。

运输保存：采用干冰保存运输。收到细胞时，若干冰已经*融化，请立即将细胞复苏培养；若尚留有干冰，请立即将细胞放入液氮中保存待用，请按条件贮存细胞，切不可将细胞置于高温环境。

OSKM-1小鼠诱导型多能干细胞一般培养方法:

1、组织块培养法

A）按照前述方法取材，将组织剪成或切成1mm3大小的小块，并加入少许培养基使组织湿润。

B）将小块均匀涂布于瓶壁，每小块间距0.2 cm～12.5px，一般在25mL培养瓶（底面积为437.5px2）可接种20～30小块为宜，小块放置后，轻轻翻转培养瓶，使瓶底朝上，然后于瓶内加入适量培养基盖好瓶塞，将瓶倾斜放置在37℃温箱内。

C）培养2～4小时，待小块贴附后，将培养瓶缓慢翻转平放，静置培养，动作要轻，严禁摇动和来回振荡，以防小鼠诱导型多能干细胞由于冲动而使小块漂起而造成培养失败，若组织块 不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。开始培养时培养基不宜多，以保持组织块湿润即可，培养24小时后再补液，培养初期移动和观察时要轻 拿轻放，开始几天尽量不去搬动，以利贴壁和生长，培养3～5天时可换液，一方面补充营养，一方面去除代谢产物和漂浮小块所产生的毒性作用。

2、消化培养法

该方法是采用前述的消化分散法，将妨碍细胞生长的细胞间质（包括基质、纤维等）去除，使细胞分散形成细胞悬液，然后分瓶培养。

3、悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。