厌氧培养箱操作使用流程及注意事项
?一、操作使用流程?
?准备工作?
将设备放置在温差小、远离热源且平稳的位置,连接氮气瓶和混合气瓶(N? 85%、H? 10%、CO? 5%),检查气路密封性?。
清洁箱体内部及手套、托盘等配件,确保无污染;检查钯催化剂是否有效?。
?启动与厌氧环境形成?
接通电源,开启照明灯和温控仪,设置目标温度(通常35–37℃)?。
?气体置换流程?:
?第一次氮气置换?:向操作室充入氮气,使手套鼓起后扎紧袋口,重复三次以降低氧含量?。
?混合气体置换?:通入混合气体(N?/H?/CO?),通过流量计控制流量至10ml/min,重复2–3次确保氧浓度极低?。
启用钯催化剂和除氧装置,1小时后用美兰指示剂检测氧浓度(不变色表示达标)?。
?样品操作与培养?
通过缓冲室传递样品:先抽真空(≥66kPa),再充入氮气或混合气体,重复2–3次以维持无氧状态?。
穿戴手套操作样品,避免空气进入;培养期间定期监测温度、湿度和氧浓度?。
?结束操作?
通过缓冲室取出样品,清洁箱内残留物,关闭电源及气源?。
?二、关键注意事项?
?安全与维护?
?气路检查?:定期检测气瓶、管道是否漏气,更换气瓶时扎紧气管防止氧气渗入?。
?催化剂维护?:钯粒需定期更换或再生,确保催化除氧效率?。
?密封性验证?:操作前检查手套、门缝密封条,抽真空后确认压力恢复时间?。
?环境控制?
箱内物品不宜过多,避免阻挡风道影响温度均匀性;长期使用需每日检查氧浓度?。
灭菌时开启紫外线灯,时间根据实验需求设定?。
?设备保养?
停止使用时,设定40℃以上运行2小时,每半小时开门10分钟以干燥箱体?。
定期校准温度、氧浓度传感器,清洁冷凝水防止传感器误差?。
?安全警示?
操作含氢气的混合气体时需远离明火,防爆防火?。
避免放置易燃、腐蚀性物品,确保设备散热空间充足?。
以上流程及注意事项整合了设备安装、环境控制、样品操作和长期维护的关键步骤,需严格遵循以确保厌氧环境稳定性和实验安全性
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