凝集素是一类能与糖结合的蛋白质或糖蛋白。部分凝集素在摄入较多时可能会对人体产生不良影响。测定食用菌中的凝集素含量能够评估其食用安全性,避免因食用含有过量凝集素的食用菌而危害健康。
根据GB/T 44734-2024,测定食用菌中凝集素的测定方法是高效液相色谱法,原理是:试样中凝集素经磷酸盐缓冲液提取,利用溶解度、分子质量差异,通过硫酸铵沉淀、超滤浓缩后,高效液相色谱法测定,以保留时间定性,外标法定量。
实验涉及标准曲线的绘制:
食用菌中凝集素标准溶液溶液:准确称取10mg食用菌中凝集素,于试管中用水溶解,并转移至10mL容量瓶中定容至刻度线。该标准溶液中食用菌中凝集素的质量浓度为1mg/mL,-20℃冰箱避光保存,有效期一周。
用5mL规格的Miragen电子移液器,设置5个体积为100、200、300、500、1000μL(程序可存储和调用),将5个体积的食用菌中凝集素标准溶液溶液分别加入至5mL容量瓶中;将以上5个容量瓶中的食用菌中凝集素标准溶液用水稀释、定容至刻度线,摇匀,得到食用菌中凝集素系列标准工作溶液,质量浓度分别为20、40、60、100、200μg/mL,按参考色谱条件测定,食用菌中凝集素典型高效液相色谱图见下图,以食用菌中凝集素质量浓度为横坐标、相应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线或计算线性回归方程。
实验室移取小体积(几微升到10毫升)的液体,一般采用移液器。Miragen电动移液器,数值靠设定或选定,电机控制活塞运动,吸液和排液也更加稳定,还有步骤少、调数快、模式多等诸多优势。
Miragen电动移液器还可给电机多段信号,从而达到吸液和排液分次数且各段体积可调,可实现单吸多排、多吸单排等效果,程序还可存储和调用,更加可靠、便捷。
免责声明
- 凡本网注明“来源:Ky开元集团”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-Ky开元集团合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:Ky开元集团”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非Ky开元集团)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。