一、配制培养基:50mL的培养基,可以用450mI DMEM (89%)+50ml胎牛血清(10%)+5ml双抗(1%)配制。
二、配制细胞冻存液:现配现用,根据细胞类型调整培养基、血清和DMSO的比例,通常为6:3:1或7:2:1。例如,对于存活率高的细胞系,可以用培养基:血清:DMSO=7:2:1的比例配制,对于存活率低的细胞系或需要长时间保存的细胞系,可以增加血清浓度。
血清使用注意事项
一、避免反复冻融。血清解冻后,可在2-8℃条件下储存6周。如解冻后的血清储存时间需要大于6周,建议分装成合适的体积并重新冻存。
二、如血清中含有大量的沉淀,不建议直接过滤血清。如有过滤需求,可将血清分装至无菌离心管中,稍微离心,取上清液直接加入培养基内混合后再过滤。
三、血清没有混匀且放置于高于40℃的水浴中,底部的蛋白会变性形成沉淀。
四、使用时注意无菌操作,防止细菌污染
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