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荧光定量PCR仪选型指南:通道数与检测灵敏度的匹配策略

来源:北京众力挽生物科技有限公司   2025年06月12日 12:00  
  一、通道数选择:实验需求与扩展性的平衡
  基础需求匹配
  单通道至四通道:适用于常规基因表达分析、病原体检测(如新冠、HPV分型),例如LightCycler96的四通道设计可覆盖FAM/VIC/ROX/Cy5等常用染料组合。
  五通道及以上:支持高复杂度多重PCR(如同时检测5种以上靶标),需结合仪器是否支持卡夹式光路设计(如QuantStudio™5的6通道系统,可通过扩展卡夹实现通道升级)。
  未来扩展性
  选择模块化通道设计(如Bio-RadCFX96的4通道系统),避免一次性投入过高成本。
  优先选择兼容主流荧光染料(FAM/HEX/ROX/Cy5)的仪器,减少染料适配成本。
  二、检测灵敏度:核心参数与实验场景的适配
  灵敏度指标
  单拷贝检测能力:如Archimed系列可检测1拷贝基因,适用于低丰度靶标(如ctDNA、病毒载量监测)。
  分辨率:1.33倍至1.5倍的拷贝数差异检测能力,满足肿瘤MRD评估、基因突变筛查等高精度需求。
  灵敏度优化技术
  温控系统:±0.25℃的温控精度(如QuantStudio™5)可减少非特异性扩增,提升低浓度样本信号稳定性。
  光学系统:采用菲涅尔透镜或高强度固态光源(如LightCycler96的白光LED),增强荧光信号采集效率。
  三、选型决策树
  常规实验:四通道+单拷贝灵敏度(如LightCycler96),覆盖基因表达、SNP分型。
  复杂多重PCR:五通道及以上+高分辨率(如QuantStudio™5),支持肿瘤多靶标检测。
  超敏检测:六通道+单拷贝灵敏度(如Archimed系列),适用于液体活检、病原体低载量监测。
  结论:选型需结合实验复杂度、样本丰度及预算,优先选择通道可扩展、灵敏度可验证的仪器,并通过预实验验证实际性能。

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