ELISA实验中洗涤步骤的常见错误有哪些?
以下是天津本生对ELISA实验中洗涤步骤的常见错误及对应的解决方案,综合实验关键环节与优化建议:
一、洗涤液配置与使用错误
缓冲液选择不当?
错误:直接使用纯PBS(不含Tween-20)洗涤,导致非特异性结合残留。
解决:需使用含0.05%-0.2% Tween-20的PBST缓冲液,降低表面张力增强洗涤效果。
洗液温度过低?
错误:冬季未预热洗液,导致洗涤不(“花板”现象)。
解决:洗液温度应维持在20-30℃,避免低温影响去污效果。
二、手工操作失误
洗涤不净
错误:洗液未注满孔或静置时间不足(<1分钟),残留未结合物质。
解决:每孔注满洗液后静置1-2分钟,重复3-5次,拍板时垂直扣干。
拍板动作不规范?
错误:左右甩动板子导致孔间交叉污染。
解决:垂直扣板于吸水纸上,避免液体飞溅。
三、洗板机操作问题
参数设置错误?
错误:吸液残留量>2μL或吸头高度不当,导致液体残留。
解决:调整吸头距孔底0.5-1mm,每日校准注液量。
维护不足?
错误:未定期清洁吸头,造成堵塞或污染。
解决:每周用10%次氯酸钠冲洗管路,更换堵塞吸头。
四、其他常见错误
错误类型? ?后果? ?解决方案?
洗涤次数不足? 高背景信号(假阳性) 增加至5-6次,最后一次延长静置时间
洗液过期/污染? 絮状物堵塞孔底 现配现用,过滤混浊洗液
封闭后未充分洗? 非特异性吸附增加 封闭后PBST洗涤3次,去除BSA
五、本生试剂盒特别提示
显色前处理?:最后一次洗涤后需拍干,避免残留液体稀释底物导致显色异常。
边缘效应?:外圈孔易残留液体,建议弃用或单独处理。
通过规范操作可减少80%的洗涤相关误差。若问题持续,建议联系技术支持获取定制化方案。
注:以上资料仅供参考,如需更详细说明,可参考具体品牌商附带产品信息。
天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。移液器吸头
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