语纯生物无外泌体胎牛血清与Gibco无外泌体胎牛血清

语纯生物无外泌体胎牛血清与Gibco无外泌体胎牛血清对比报告

一.实验材料

无外泌体胎牛血清(语纯生物)，无外泌体胎牛血清(GibcoA27208-03)，BMSC(CTCC)，DMEM高糖培养基(HycloneSH30243.01B)，100X青霉素-链霉素溶液(上海生工E607011-0100)，0.25%胰酶(碧云天C0201)，0.22μm滤膜(Millex)，外泌体提取试剂盒(贝博BB-3901-1)

二.实验仪器

细胞培养箱(ThermoScientific8000)，光学显微镜(上海精密仪器仪表有限公司XDS-1A)，倒置显微镜(OLYMPUS,IX71)，超净工作台(上海沪净医疗器械有限公司SW-CJ-2D)，电热恒温水浴槽(贺德DK-08D)，超高速离心机(BeckmanOptinal-90K)

三.无外泌体胎牛血清制备方法

1.制备工艺和参数略；

2.用0.1μm的滤膜过滤上清液，即得无外泌体胎牛血清。

四.外泌体制备及鉴定

1.BMSC细胞在正常含FBS的培养基中培养一定的时间后，细胞融合度约为60%-70%时，移去原有含血清的培养基，分别换成语纯生物无外泌体胎牛血清和Gibco无外泌体胎牛血清；

2.继续培养48h左右，细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清液；

3.用外泌体提取试剂盒进行外泌体提取；

4.通过电镜和WesternBlot技术进行外泌体鉴定，结果显示语纯生物无外泌体胎牛血清和Gibco无外泌体胎牛血清制备外泌体的效果基本一致。