使用噬菌体展示鉴定免疫原性共生抗原

体液免疫在建立和维持宿主-微生物群共生以及对病原微生物的免疫力中起着重要作用。然而，鉴定在屏障和全身组织内引发适应性免疫反应的抗原是进一步理解这种宿主-微生物对话的重大障碍。在这里，我们提供了一种方案，通过使用噬菌体（噬菌体）展示介导的抗体/抗原生物淘选来鉴定共生微生物和病原微生物表达的免疫原性蛋白抗原。该程序需要生成 M13 噬菌粒文库，生产 ORFeome（开放阅读框总量）噬菌体文库，然后进行多轮基于亲和力的免疫沉淀，随后通过 ELISA、ELISPOT 和/或 B 细胞四聚体生成进行抗原验证。该方案经过优化，可识别引发 IgA 和 IgG 同种型反应的抗原，并可以使用循环抗体或肠道抗体进行抗原鉴定。编码推定蛋白抗原的单克隆噬菌体的生成和分离能够通过 Sanger 测序轻松鉴定免疫原性抗原，通常提供携带表位区域的蛋白质结构域级分辨率。我们的方案可以由训练有素的分子生物学家执行，并能够在数周内进行抗原鉴定和验证。

原标题：Identification of immunogenic commensal antigens using phage display
源于Nature Protocols (2025) 通讯作者：Samantha Kimmel & Oliver J. Harrison

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