手机版
Ky开元集团手机版
Ky开元集团小程序
官方微信
公众号：chem17
扫码关注视频号
在生命科学研究领域，精准定量核酸分子是众多实验的核心环节，从基因表达分析、病原体检测到遗传疾病诊断等，无一不需要可靠的定量手段。KAPA PROBE FAST 通用型 PROBE 荧光定量技术，凭借其的技术优势，在荧光定量 PCR（qPCR）领域崭露头角，为科研工作者提供了高效、精准的核酸定量解决方案。
一、技术核心亮点
（一）高性能聚合酶
KAPA PROBE FAST 体系采用经特殊优化的热启动 DNA 聚合酶，该酶具备的扩增性能。其热启动特性可有效避免在反应起始阶段因引物错配导致的非特异性扩增，确保反应高度特异性。在扩增效率上，相较于传统 Taq DNA 聚合酶，能以更快速度延伸 DNA 链，极大缩短了反应时间。例如，在常规 1kb 片段扩增中，传统酶可能需数分钟延伸时间，而此聚合酶可在 1 分钟内高效完成，大大提升实验效率，尤其适用于高通量实验场景，能在短时间内处理大量样本，加快研究进程。同时，该聚合酶还拥有出色的保真性，在复制 DNA 过程中，错配率极低，可精准复制目标核酸序列，为准确的定量结果奠定基础，防止因碱基错配导致定量偏差。
（二）优化的反应缓冲液系统
反应缓冲液是 PCR 反应的 “土壤”，KAPA PROBE FAST 的缓冲液系统经过精心调配。缓冲液成分能精准维持反应体系的 pH 稳定，在整个 PCR 循环过程中，即便温度大幅变化，也能保证体系 pH 处于聚合酶活性最佳范围，确保酶活性稳定，使扩增反应平稳进行。此外，缓冲液中添加了特殊的增强剂，可有效增强聚合酶与模板 DNA 的结合力，提高扩增效率，同时增强对复杂模板（如富含 GC 区域、存在二级结构的模板）的扩增能力，突破常规 PCR 在处理此类模板时的瓶颈，让更多复杂样本的核酸定量成为可能。
（三）灵敏的荧光探针检测机制
该技术搭配高度灵敏的荧光探针，常用 TaqMan 探针。探针设计巧妙，5’端标记报告荧光基团，3’端标记淬灭荧光基团。在完整探针状态下，淬灭基团抑制报告基团荧光发射。当 PCR 扩增过程中，聚合酶延伸至探针结合位置，其 5’-3’外切酶活性将探针酶切，使报告基团与淬灭基团分离，释放荧光信号。该荧光信号强度与扩增产物量呈严格线性关系，可实时、精准监测 PCR 进程。例如在病原体核酸定量中，能通过荧光信号快速、准确测定样本中病原体核酸拷贝数，为疾病早期诊断、病情监测提供关键数据支持。而且，该荧光检测机制具备高度特异性，仅当探针与目标序列互补配对时才会产生有效荧光信号，极大降低假阳性结果，保障实验准确性。
二、实验流程优势
（一）简便快捷的反应体系构建
KAPA PROBE FAST 通用型试剂盒提供预混试剂形式，包含除模板和引物外的所有必要成分，如 DNA 聚合酶、dNTPs、缓冲液及 MgCl?等，只需按比例加入模板 DNA 和特异性引物，即可快速构建反应体系。这种预混形式减少了试剂准备步骤，降低实验操作误差，提高实验重复性。例如在多批次基因表达分析实验中，实验人员无需每次繁琐地分别量取多种试剂，节省大量时间精力，同时保证各批次反应体系一致性，使实验结果更具可比性。
（二）高效的扩增程序
基于高性能聚合酶和优化反应体系，KAPA PROBE FAST 荧光定量 PCR 扩增程序更为高效。其退火温度范围宽泛，能适应多种引物对，减少引物优化时间。例如，在常见引物设计中，多数引物可在 55 - 65℃较宽温度区间内实现高效退火，无需为每对引物精确摸索最佳退火温度。且延伸时间显著缩短，如前所述，对常见长度片段，能在极短时间内完成扩增。整个 PCR 反应循环次数通常也可适当减少，在保证扩增效果前提下，进一步缩短实验周期，让科研人员更快获取实验结果，加速研究进度。
（三）精准的结果分析
实验完成后，KAPA PROBE FAST 技术凭借灵敏的荧光检测和配套数据分析软件，可实现精准结果分析。软件能自动采集荧光信号数据，实时生成扩增曲线和熔解曲线。扩增曲线直观反映 PCR 扩增进程，通过 Ct 值（循环阈值，即荧光信号达到设定阈值时的 PCR 循环数）可精准定量初始模板含量。熔解曲线则用于分析扩增产物特异性，单一尖锐峰表明产物特异性良好，若出现杂峰则提示存在非特异性扩增，方便实验人员及时判断实验结果可靠性。软件还具备强大数据处理功能，可进行多组数据比较、统计分析等，为科研人员深入挖掘实验数据价值提供有力支持。
三、广泛的应用领域
（一）基因表达分析
在基础生物学研究中，探究基因表达变化是理解细胞生理过程、疾病发生机制的关键。KAPA PROBE FAST 技术可精确测定不同组织、细胞类型或不同处理条件下基因表达量差异。例如在肿瘤研究中，通过对比肿瘤组织与正常组织中癌基因、抑癌基因表达水平，有助于揭示肿瘤发生发展分子机制，为肿瘤诊断、治疗靶点筛选提供理论依据。在药物研发领域，利用该技术监测药物作用下细胞基因表达谱改变，评估药物疗效和潜在副作用，加速药物研发进程。
（二）病原体检测
在临床诊断和公共卫生领域，快速、准确检测病原体至关重要。无论是病毒（如新冠病毒、流感病毒）、细菌（如结核杆菌、大肠杆菌）还是真菌（如白色念珠菌）感染，KAPA PROBE FAST 荧光定量 PCR 技术都能大显身手。通过设计特异性引物和探针，可针对病原体核酸序列进行扩增检测，实现早期、精准诊断。在疫情防控中，能快速筛查大量疑似病例，及时发现传染源，为疫情防控争取宝贵时间，对控制传染病传播具有重要意义。
（三）遗传疾病诊断
许多遗传疾病由基因缺陷引起，KAPA PROBE FAST 技术可用于检测相关基因突变、缺失或拷贝数变异。如在唐氏综合征诊断中，通过定量 21 号染色体特定区域基因拷贝数，判断胎儿是否患有唐氏综合征。在单基因遗传病（如囊性纤维化、地中海贫血）诊断中，能精准检测致病基因突变位点，为遗传咨询、产前诊断提供可靠依据，帮助家庭预防遗传疾病患儿出生，提高人口素质。
综上所述，KAPA PROBE FAST 通用型 PROBE 荧光定量技术以其先进技术核心、便捷实验流程和广泛应用领域，成为生命科学研究和临床诊断等领域的有力工具，为推动科研进展、提升医疗诊断水平发挥重要作用，助力科研人员和临床工作者攻克更多难题，为人类健康事业贡献力量。
相关产品
免责声明
- 凡本网注明“来源：Ky开元集团”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-Ky开元集团合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：Ky开元集团”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源（非Ky开元集团）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。
采购中心
