CELL-WISE 293 培养基(货号:CW001)具体说明
产品特性
应用场景:专为HEK293 细胞(如 293-F、293-T、Expi-293F 等)的高密度悬浮培养及瞬时转染设计,支持细胞高效扩增与外源基因表达。
成分优势:
无蛋白、无动物源成分、化学成分wan全限定,排除血清批次差异及病毒污染风险,保障实验稳定性与可重复性。
即用型配方,无需额外添加成分,开瓶后可直接使用,简化实验操作流程。
技术参数
项目 | 指标 |
外观 | 澄清透明红色液体 |
渗透压 | 275±15 mOSM |
pH 值 | 6.9~7.4 |
无菌检测 | 无菌(通过无菌培养验证) |
内毒素 | <5 EU/mL |
储存条件 | 2~8℃,避光保存 |
有效期 | 12 个月(未开封) |
产品用途
仅限科学研究使用(如重组蛋白生产、病毒载体包装等),严禁用于人类或动物的诊断、治疗及临床应用。
细胞驯化操作指南
一、直接驯化(适用于多数细胞株)
若细胞已适应无血清悬浮培养体系,可直接通过常规传代稀释更换为 Balance CD 293 培养基,无需逐步过渡。
二、渐进式驯化(适用于敏感细胞或传统培养基培养的细胞)
注意事项:选择 ** 低代次(≤P10)、处于对数生长期(活率 > 95%)** 的细胞进行驯化。
操作步骤:
基础传代阶段
在原培养基中复苏细胞,连续传代2~3 次至生长状态稳定。
当细胞密度达 2×10? cells/mL 时,以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度传代,使用 75% 原培养基 + 25% Balance CD 293 培养基 的混合体系。
培养条件
环境:37℃,5% CO?,恒温摇床转速 110~175 rpm(根据培养体积调整)。
比例递增阶段
培养 3~4 天后,若细胞密度达 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,传代时调整混合比例为 50% 原培养基 + 50% Balance CD 293 培养基,接种密度维持 0.5×10? cells/mL。
若细胞生长缓慢:可离心保留 20% 条件培养基,加入 80% 新配的 75% 原培养基 + 25% Balance CD 293 培养基 继续培养。
wan全切换阶段
重复上述步骤,逐步提高 Balance CD 293 培养基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% 目标培养基。
适应验证
细胞在 100% 培养基中传代3~4 次后,若密度达 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%,即完成驯化。
后续传代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建议再传代2~3 次后进行转染实验。
重要提示:
驯化初期(前 3 代)细胞状态可能波动,通常从第 4 代起逐渐改善。
驯化过程中需定期监测细胞密度、活率及形态,避免污染或代谢物积累影响细胞适应。
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