MethylFlash全球DNA 羟甲基化（5-hmC）极速分析试剂盒（比色法），低噪灵敏

5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）作为一种第六种 DNA 碱基，在转录调控中具有功能，已在人类和小鼠大脑以及胚胎干细胞（ES）中被检测到含量丰富。在哺乳动物中，它可以通过 TET 家族的 5-mC-羟化酶介导的 5-mC 氧化反应生成。5-hmC 已被证明具有组织特异性，在培养细胞系中几乎无法检测到，而在人类大脑组织中可达 0.6%，在某些其他物种中甚至可高达总 DNA 的 8%。5-hmC 作为一种重要的表观遗传修饰在表型和基因表达中的生物学意义已逐渐被认可。例如，几乎所有癌症中都表现出全球 5-hmC 含量的降低（DNA 低甲基化），并被提议作为癌症的分子标志物和治疗靶点。

MethylFlash 全球 DNA 羟甲基化（5-hmC）ELISA 简易试剂盒（比色法） 是一套经过优化的缓冲液和试剂组合，通过特异性检测 5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）水平，以比色法定量检测全球 DNA 羟甲基化状态。该试剂盒采用 EpigenTek 流行的全球 DNA 甲基化技术的第四代技术，进一步改进了前代 MethylFlash 试剂盒，提高了速度、简便性、灵敏度和可重复性。

本试剂盒还特别优化为与 MethylFlash™ 全球 DNA 甲基化（5-mC）ELISA 简易试剂盒（比色法） 配对使用，可同时定量检测甲基化 DNA 和羟甲基化 DNA。

艾美捷MethylFlash全球DNA羟甲基化（5-hmC）极速分析试剂盒（比色法）（#P-1032-48）优势与特点：

快速：步骤精简，整个过程仅需 2 小时。

稳健：改进的试剂盒配方使检测具有更大的“信号窗口”，减少了复孔之间的变异。

便捷：背景噪声低，无需 DNA 变性或平板封闭步骤。

灵敏：z低可检测 100 ng 输入 DNA 中 0.01% 的羟甲基化 DNA。

特异：对 5-hmC 具有高特异性，在样本 DNA 的指示浓度范围内不与未甲基化胞嘧啶或甲基化胞嘧啶发生交叉反应。

通用：包含阳性和阴性对照，可检测任何物种的单链或双链输入 DNA 中的 DNA 羟甲基化。

准确：优化的阳性对照可以按百分比比例化，使检测结果更准确，并与 HPLC-MS 分析高度可比。

灵活：条孔微孔板格式，适用于手动或高通量分析。

注：基于单一样本的双复孔检测。  

原理与流程：

本试剂盒包含定量检测全球 DNA 羟甲基化所需的全部试剂。在检测中，DNA 被固定在经过特殊处理、具有高 DNA 亲和力的条孔中。使用基于 5-hmC 单克隆抗体（mAb）的检测复合物一步法检测羟甲基化 DNA，然后通过微孔板光谱光度计读取吸光度进行比色定量。羟甲基化 DNA 的百分比与测量的 OD 强度成正比。

起始材料：

输入 DNA 应相对纯净，260/280 比值 >1.6，可用水或 TE 缓冲液稀释。每反应的 DNA 用量范围为 20 ng 至 200 ng。然而，我们推荐使用 100 ng DNA，这是获得最佳结果的优化输入量。

文献引用：

Aguilera M et. al. (May 2025). Altered Ten Eleven Translocation Methylcytosine Dioxygenase Expression and DNA Hydroxymethylation in a Mouse Model of Prostate Cancer. Prostate.

Im H et. al. (April 2025). Epigenetic and Gene Expression Responses of Daphnia magna to Polyethylene and Polystyrene Microplastics. Molecules. 30(7)

Im H et. al. (April 2025). Epigenetic and Gene Expression Responses of Daphnia magna to Polyethylene and Polystyrene Microplastics. Molecules. 30(7)