dànbáizhì组学是一门研究生物体内所有dànbáizhì及其相互作用的学科,其中dànbáizhì组的差异分析是dànbáizhì组学的重要分支,旨在比较不同生物样本间dànbáizhì表达的差异,以揭示生物过程和疾病机制。关于dànbáizhì组的差异性分析主要有两种方法:一种是通过二维电泳技术筛选差异蛋白,然后进行质谱分析以鉴定差异dànbáizhì相关信息;另一种是wánquán基于质谱仪的高通量测序技术,通过对蛋白多肽标记后进行定量分析寻找出差异蛋白。
二维凝胶电泳技术(2-DE)
DE是dànbáizhì组学研究中zuì早应用的技术。迄今为止,它仍是dànbáizhì组学研究中常用的分离手段。dànbáizhì组学研究的核心在于确保分离出的dànbáizhì具有高分辨率和可重复性,2-DE凭借它在分离上千dànbáizhì的同时,还能通过显色技术对差异表达dànbáizhì进行定量分析,被广泛应用于dànbáizhì组学研究中。它的主要步骤包括:dànbáizhì样品制备、等电聚焦(IEF)、SDS-PAGE、染色等。
图1 2-DE一般流程
质谱技术(MS)
在整个dànbáizhì组学研究中,准确鉴定分离蛋白是zuì关键的步骤。质谱鉴定技术具有高灵敏度、高通量、高时效性等特点,在dànbáizhì组学研究中一直扮演着重要的角色。传统的质谱技术只能用于小分子量物质的分析,但随着科技的进步质谱技术也得到了长足发展,能对更加复杂的物质进行检测同时自动化程度和jīngquè度更高。常见dànbáizhì质谱鉴定技术有:基质辅助激光解析电离飞行质谱(MALDI-TOF-MS)、电喷雾质谱(ESI-MS)、蛋白指纹谱鉴定(PMF)、串联质谱法(MS/MS)、液相色谱联用质谱(LC-MS)等。
图2 质谱技术的一般流程
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