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单克隆抗体糖型分析的常用方法

时间:2025-6-23阅读:22
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单克隆抗体糖型分析的常用方法检测技术服务详情介绍

单克隆抗体(mAbs)由单一的B淋巴细胞克隆产生,它们与特定的抗原有高度特异性的结合。除了dànbáizhì结构,单克隆抗体的糖链也对其功能、生物分布、免疫原性和稳定性有重要影响。因此,对单克隆抗体的糖型进行分析是药物开发中的一个关键步骤。


以下是常用的单克隆抗体糖型分析方法:


1.毛细管电泳-质谱联用(CE-MS):

这种方法特别适合于分析N-糖型。毛细管电泳用于分离糖型,而质谱用于结构鉴定。


2.液相色谱-质谱联用(LC-MS):

可以用于分析N-糖和O-糖。首先利用酶解或化学方法从抗体上释放糖,然后使用液相色谱进行分离和质谱进行结构鉴定。


3.荧光标记和HPLC分析:

糖链首先被释放并与荧光标签反应,然后使用HPLC进行分离和定量。


4.糖凝集素结合测定(Lectin Blotting):

使用特定的糖凝集素与特定糖结构结合,可以用于鉴定特定的糖型结构。


5.NMR(核磁共振):

可以提供关于糖结构的详细信息,但需要较大的样品量,并且技术要求较高。


6.酶联免疫吸附试验 (ELISA):

使用特定的糖型结合蛋白或抗体来检测和定量糖链。


每种技术都有其优势和限制。选择哪种方法通常取决于分析的目的、样品的可用量、所需的灵敏度和分辨率以及可用的仪器设备。在药物开发的不同阶段,可能需要使用多种技术来全面评估产品的糖型异质性和一致性。

百泰派克不同生物内产生的不同类型的N-聚糖

图1

单克隆抗体糖型分析的常用方法检测技术服务详情介绍

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