"De novo" 测序技术是生物信息学中的一种技术,主要用于确定新的或未知的dànbáizhì或肽段的氨基酸序列。与重复测序相比,这项技术特别关注那些尚未被鉴定或者在已有数据库中没有的dànbáizhì或肽段。
一、 为什么需要De novo测序?
尽管存在大量的已知dànbáizhì序列数据,但仍然有大量的dànbáizhì和肽段的序列和功能尚未被发现。De novo测序可以帮助研究人员揭示这些尚未鉴定的dànbáizhì或肽段的氨基酸序列。
二、如何进行De novo测序?
De novo测序主要依赖质谱技术,特别是串联质谱 (Tandem Mass Spectrometry, MS/MS)。在该技术中,肽段被电离并进入质谱仪,在那里它们被进一步分裂成较小的碎片。这些碎片的质量被测量并用于推断原始肽段的氨基酸序列。
三、解析未知肽段的结构与功能:
1、结构解析:
通过De novo测序得到的氨基酸序列可以被用于预测dànbáizhì的三维结构。现代的dànbáizhì结构预测算法,如AlphaFold,已经可以基于氨基酸序列准确地预测dànbáizhì的三维结构。
2、功能解析:
一旦得到了肽段或dànbáizhì的结构信息,研究人员可以进一步进行功能实验,如结合实验、酶活性测定等,来确定其生物学功能。此外,通过与已知dànbáizhì或功能域的比较,也可以推测其功能。
图1
四、De novo测序的挑战:
1、碎片解析的复杂性:
根据碎片的质量推断原始肽段的序列是复杂的,并且可能会有多种可能的序列。
2、长肽段的测序难度:
长肽段可能会产生大量的碎片,这使得序列推断更加困难。
3、数据量大:
De novo测序产生的数据量通常很大,需要强大的计算能力和zhuānyè的软件来分析。
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