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诺博莱德 考马斯亮蓝G250染料试剂

考马斯亮蓝G250染料试剂   凝胶染色

Bradford 法是常用的蛋白浓度检测的方法，与传统方法相比，更简单、更稳定、兼容性更 好，Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M，DTT的浓度可高达5mM，但受高浓度的去垢剂的影响明显，故在用BradfordProtein Assay Kit 进行蛋白定量时，需确保SDS低于0.01%，TritonX-100低于0.05%，Tween20,60, 80 低于0.015%，含高浓度去污剂的蛋白定量，建议采用BCAProteinAssayKit。

考马斯亮蓝G250染料试剂由考马斯亮蓝G250、乙醇、磷酸等组成，用于考马斯染料结合 (Bradford)分析的总蛋白测量，其特点在于对蛋白样品中可能存在的大多数盐、溶剂、缓冲液、 硫醇、金属螯合剂、还原性物质等均不排斥，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到 0.5μg，待测样品体积为1～20μl，在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。

自备材料

1、酶标仪或分光光度计

2、蒸馏水

3、96 孔板或比色杯

操作步骤(仅供参考)

1、稀释蛋白标准(一般为BSA5mg/ml)使其终浓度为0.5mg/ml。注意：蛋白样品在什么溶液中，蛋白标准也应用什么溶液稀释，也可以用0.9%NaCl或PBS稀释蛋白标准。

2、将标准品按0,1,2,4,8,12,16,20μl 加到 96 孔板的蛋白标准孔中，加蛋白标准稀释液补足至 20μl。

3、加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加标准品稀释液至20μl。

4、各孔加入200μl考马斯亮蓝G250染料试剂，室温放置3～5min。

5、酶标仪测定595nm波长处的吸光值，560~610nm之间的波长也可。

6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

考马斯亮蓝G250染料试剂   凝胶染色

产品订购信息：

P2810 考马斯亮蓝G250染料试剂  100ml / 500ml