IEF考马斯亮蓝染色液 凝胶染色 返回列表页

诺博莱德 IEF考马斯亮蓝染色液

IEF考马斯亮蓝染色液   凝胶染色

产品简介：

考马斯亮蓝染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考马斯亮蓝 R250 为染料可用于 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 等蛋白电泳胶的常规染色或 Western 转膜后 PAGE 胶上残余蛋白的检测。

等点聚焦染色后考马斯亮蓝染色又称 IEF 考马斯亮蓝染色，一般与三lv乙酸溶液及脱色液 联合使用。本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。

用途：IEF蛋白电泳胶的染色

自备材料：

1、20%三lv乙酸水溶液

2、水平或侧摆摇床

3、蒸馏水

4、20%甘油水溶液

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

操作步骤(仅供参考)：

1、临用前，取适量的考马斯亮蓝染色液和硫酸铜溶液，按 99:1 的比例混合，即为 IEF 考 马斯亮蓝染色液，即配即用。

2、等点聚焦电泳结束后，取凝胶放入 5-10 倍体积的 20%三lv乙酸水溶液，置于水平或侧 摆摇床上缓慢摇动 30-60min。

3、倾去 20%三lv乙酸水溶液，加入 10 倍体积的 30%甲醇水溶液(含 10%醇)，置于水 平或侧摆摇床上缓慢摇动 15-20min。

4、倾去 30%甲醇水溶液(含 10%乙醇)，加入新鲜配制的 IEF 考马斯亮蓝染色液，置于水 平或侧摆摇床上缓慢摇动 20min 以上(胶厚度小于等于 1mm)或 1h 以上(胶厚度大于 1mm)。

5、倾去染色液，用蒸馏水冲洗。

6、加入适量常规脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶；推荐常规脱色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。

7、置于水平或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色 4～24h，期间更换脱色液 2～4 次，直至蓝 色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期，通常蛋白条带在脱色 1～2h 后即可出现。

8、完成脱色后把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如 需避免溶涨，可以把胶保存在含 20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶

注意事项：

1、染色时如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热，可以大大加快染色速度。但 加热时宜尽量避免沸腾，以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。

2、脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色； 脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。

3、如果希望染色的背景更低，希望获得更加清晰的蛋白条带，可以加入适量的室温蒸馏水 进行洗涤。通过蒸馏水洗涤可以进一步降低背景。在 4℃蒸馏水中浸泡过夜可以获得背景更 低，条带更清晰的条带。在次日对 4℃蒸馏水浸泡过夜的已经进行了染色的凝胶再同前一天 一样进行染色和洗涤可以进一步改善染色效果，获得更好的考染蛋白条带。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

IEF考马斯亮蓝染色液   凝胶染色

产品订购信息：

P2840 IEF考马斯亮蓝染色液 100ml / 500ml