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β-木糖苷酶测定试剂盒 糖代谢系列

参  考  价面议
具体成交价以合同协议为准

产品型号BI6052

品       牌NobleRyder/诺博莱德

厂商性质经销商

所  在  地北京市

更新时间:2025-04-11 15:28:45浏览次数:97次

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供货周期 现货 规格 50T/24S
货号 BI6052 应用领域 环保,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药
主要用途 应用于微生物发酵;作为生物漂白剂应用于造纸工业
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。
β-木糖苷酶测定试剂盒 糖代谢系列


β-木糖苷酶(β- xylosidase测定试剂盒说明书

分光光度法 50 /24 

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。

测定原理:

β-木糖苷酶催化对硝基ben酚-β-D-木糖苷产生对硝基ben酚,对硝基ben酚在 405nm 处有特征吸收峰,测定405nm 光吸收增加速率,可计算β-木糖苷酶活性。


β-木糖苷酶测定试剂盒 糖代谢系列

组成:

产品名称

BI6052-50T/24S

Storage

提取液:液体

50ml

4℃

试剂一:液体

2ml

4℃避光

试剂二:粉剂

20ml

4℃

试剂三:原液

20ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml 玻璃比色皿和蒸馏水。


具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准


粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml) 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃,离心 20min,取上清待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(ml) 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加 1ml 提取液,冰浴超声波破碎细胞功率 300w,超声 秒,间隔 秒,总时间 3min);然后 10000g 4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。

3. 液体:直接检测。

测定操作表:

 


对照管

测定管



酶液(μl)

200

200


试剂一(μl)


50

试剂二(μl)

400

350

混匀,45℃水浴 20min

试剂三(μl)

400

400

混匀,静置 5min,蒸馏水调零,405nm 处测定吸光值A,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。

每个测定管设一个对照管。

 

β-木糖苷酶活性计算公式:

标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x 为标准品浓度(μmol/ml),y 为吸光值ΔA

1、按蛋白浓度计算

酶活定义:45℃,pH7.4 时每毫克蛋白 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/ mg prot)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷(V ×Cpr)÷T×1000

= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr

2、按样本质量计算:

酶活定义:45℃,pH7.4 时每克样品 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/g 鲜重)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W

3. 按细胞数量计算:

酶活定义:45℃,pH7.4 时每 104 个细胞 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/104cell)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷V 样×V 样总÷细胞数量(万个

÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 细胞数量(万个

4按液体体积计算

酶活定义:45℃,pH7.4 时每毫升液体 1min 内催化产生 1 nmol 对硝基ben酚为一个酶活单位。

β-木糖苷酶活性(nmol/min/ ml)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷V 样÷T×1000

=11.34×(ΔA-0.0011)

V 样总:加入提取液体积,1ml V 反总:反应总体积,0.6ml;V 样:反应中样品体积,0.2ml;Cpr:样本蛋白浓度,mg/ml;W:样品质量,g;T:反应时间,20min;1000:1μmol/ml=1000nmol/ml

ΔA 控制在 0.01-2 范围内,若ΔA 大于 2,可适当减小样本量。标准曲线线性范围为:0.01μmol/ml-0.5μmol/ml

β-木糖苷酶测定试剂盒 糖代谢系列



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